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血管細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基是一種無(wú)菌、不含酚紅的液體組織培養(yǎng)基，旨在用作完整 ATCC 原代細(xì)胞解決方案系統(tǒng)中的一個(gè)組件。血管細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基旨在支持源自正常人大血管的細(xì)胞，例如人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞、主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞或主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞，以及微血管內(nèi)皮細(xì)胞。此外，為了支持血管系統(tǒng)細(xì)胞的增殖和鋪板效率，血管細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基必須補(bǔ)充適當(dāng)?shù)募?xì)胞特異性生長(zhǎng)試劑盒。
具體應(yīng)用
血管細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基是一種無(wú)菌、不含酚紅的液體組織培養(yǎng)基，旨在用作完整 ATCC® Primary Cell Solutions™ 系統(tǒng)的一個(gè)組件。
該系統(tǒng)旨在支持源自正常人類大血管的細(xì)胞，例如人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞、主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞或主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞，以及微血管內(nèi)皮細(xì)胞。血管細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基含有必需和非必需氨基酸、維生素、其他有機(jī)化合物、微量礦物質(zhì)和無(wú)機(jī)鹽。為了支持血管系統(tǒng)細(xì)胞的增殖和鋪板效率，血管細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基必須補(bǔ)充適當(dāng)?shù)募?xì)胞特異性生長(zhǎng)試劑盒。
該系統(tǒng)旨在支持源自人類心血管系統(tǒng)的細(xì)胞，包括以下細(xì)胞類型：
源自大血管的內(nèi)皮細(xì)胞
微血管內(nèi)皮細(xì)胞
源自大血管的平滑肌細(xì)胞
源自心臟的肌肉細(xì)胞
該系統(tǒng)旨在支持源自正常人類大血管的細(xì)胞，例如人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞、主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞或主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞，以及微血管內(nèi)皮細(xì)胞。血管細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基含有必需和非必需氨基酸、維生素、其他有機(jī)化合物、微量礦物質(zhì)和無(wú)機(jī)鹽。為了支持血管系統(tǒng)細(xì)胞的增殖和鋪板效率，血管細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基必須補(bǔ)充適當(dāng)?shù)募?xì)胞特異性生長(zhǎng)試劑盒。
原代心肌細(xì)胞；正常，人類，ATCC PCS-120-010
原代主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞；正常，人類，ATCC PCS-100-012
原發(fā)性冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞；正常，人類，ATCC PCS-100-021
原發(fā)性肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞；正常，人類，ATCC PCS-100-023
原代真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞；正常、人類、新生兒、ATCC PCS-110-010
原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞；正常，人類，ATCC PCS-100-010
原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞；正常，人類，混合，ATCC PCS-100-013
原代主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞；正常，人類，ATCC PCS-100-011
原代冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞；正常，人類，ATCC PCS-100-020
原代肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞；正常，人類，ATCC PCS-100-022
慶大霉素-兩性霉素 B 溶液 (ATCC PCS-999-025)
青霉素-鏈霉素-兩性霉素 B 溶液 ( ATCC PCS-999-002 )
酚紅 ( ATCC PCS-999-001 )
微血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)試劑盒-BBE ( ATCC PCS-110-040 )
微血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)試劑盒-VEGF ( ATCC PCS-110-041 )
內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)試劑盒-BBE ( ATCC PCS-100-040 )
內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)試劑盒-VEGF ( ATCC PCS-100-041 )
對(duì)于源自大血管的內(nèi)皮細(xì)胞（例如，正常原代人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 (HUVEC)、ATCC PCS-100-010、原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞；正常、人、混合、ATCC PCS-100-013、原代主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Cells，ATCC PCS-100-011），用以下試劑盒之一補(bǔ)充血管細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基：
對(duì)于源自正常人體組織的微血管內(nèi)皮細(xì)胞（例如，原代真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞；正常、人類、新生兒、ATCC PCS-110-010），用以下試劑盒之一補(bǔ)充血管細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基：
對(duì)于源自大血管的平滑肌細(xì)胞（例如，原代主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞，ATCC PCS-100-012），用血管平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)試劑盒（ATCC PCS-100-042）補(bǔ)充血管細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基。
可選媒體補(bǔ)充：
處理程序
完整生長(zhǎng)培養(yǎng)基的制備
表 1.如果使用內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)試劑盒-BBE (ATCC ® PCS-100-040)，請(qǐng)?zhí)砑用糠N成分的一定體積：
成分 | 體積 | 最終濃度 |
牛腦提取物 (BBE) | 1.0毫升 | 0.2% |
重組人EGF | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
L-谷氨酰胺 | 25.0毫升 | 10毫米 |
硫酸肝素 | 0.5毫升 | 0.75 單位/毫升 |
氫化可de松半琥珀酸酯 | 0.5毫升 | 1微克/毫升 |
胎牛血清 | 10.0毫升 | 2% |
| 抗壞血酸 | 0.5毫升 | 50微克/毫升 |
表 2 . 如果使用內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)試劑盒-VEGF (ATCC ® PCS-100-041)，請(qǐng)?zhí)砑用總€(gè)成分的一定體積：
成分 | 體積 | 最終濃度 |
重組人VEGF | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
重組人EGF | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
rh FGF 堿性 | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
重組人IGF-1 | 0.5毫升 | 15納克/毫升 |
L-谷氨酰胺 | 25.0毫升 | 10毫米 |
硫酸肝素 | 0.5毫升 | 0.75 單位/毫升 |
氫化可de松半琥珀酸酯 | 0.5毫升 | 1微克/毫升 |
胎牛血清 | 10.0毫升 | 2% |
抗壞血酸 | 0.5毫升 | 50微克/毫升 |
表 3 . 如果使用血管平滑肌生長(zhǎng)試劑盒 (ATCC ® PCS-100-042)，請(qǐng)?zhí)砑用總€(gè)組件的一定體積：
成分 | 體積 | 最終濃度 |
rh FGF-堿性 | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
重組人胰島素 | 0.5毫升 | 5微克/毫升 |
抗壞血酸 | 0.5毫升 | 50微克/毫升 |
L-谷氨酰胺 | 25.0毫升 | 10毫米 |
重組人EGF | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
胎牛血清 | 25.0毫升 | 5% |
表 4.如果使用微血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)試劑盒-BBE (ATCC ® PCS-110-040)，請(qǐng)?zhí)砑用糠N成分的一定體積：
成分 | 體積 | 最終濃度 |
牛腦提取物 (BBE) | 1.0毫升 | 0.2% |
重組人EGF | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
L-谷氨酰胺 | 25.0毫升 | 10毫米 |
硫酸肝素 | 0.5毫升 | 0.75 單位/毫升 |
氫化可de松半琥珀酸酯 | 0.5毫升 | 1微克/毫升 |
胎牛血清 | 25.0毫升 | 5% |
抗壞血酸 | 0.5毫升 | 50微克/毫升 |
表 5 . 如果使用微血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)試劑盒-VEGF (ATCC ® PCS-110-041)，請(qǐng)?zhí)砑用糠N成分的一定體積：
成分 | 體積 | 最終濃度 |
重組人VEGF | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
重組人EGF | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
rh FGF 堿性 | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
重組人IGF-1 | 0.5毫升 | 15納克/毫升 |
L-谷氨酰胺 | 25.0毫升 | 10毫米 |
硫酸肝素 | 0.5毫升 | 0.75 單位/毫升 |
氫化可de松半琥珀酸酯 | 0.5毫升 | 1微克/毫升 |
胎牛血清 | 25.0毫升 | 5% |
抗壞血酸 | 0.5毫升 | 50微克/毫升 |
表 6.如果使用心肌細(xì)胞生長(zhǎng)試劑盒 (ATCC ® PCS-120-040)，請(qǐng)?zhí)砑用糠N成分的一定體積：
成分 | 體積 | 最終濃度 |
L-谷氨酰胺 | 25.0毫升 | 10毫米 |
胎牛血清 | 25.0毫升 | 5% |
胎球蛋白 | 5.0毫升 | 25毫克/毫升 |
重組人FGF-b | 0.5毫升 | 5納克/毫升 |
重組人胰島素 | 0.5毫升 | 5毫克/毫升 |
抗壞血酸 | 0.5毫升 | 50微克/毫升 |
重組人EGF/TGF-b1 | 0.5毫升 | 5 納克/毫升，30 皮克/毫升 |
增殖不需要抗菌劑和酚紅，但如果需要可以添加。表 7 總結(jié)了添加到完整生長(zhǎng)培養(yǎng)基中的每種可選組分的建議體積。
從冰箱中取出一套生長(zhǎng)套件；確保所有組件的蓋子均已擰緊。
在將生長(zhǎng)套件的組件添加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中之前將其解凍。在添加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基之前，需要在 37°C 水浴中加熱 L-谷氨酰胺組分并搖動(dòng)以溶解任何沉淀物。
從冷藏處獲取一瓶血管細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 (475 mL)。
用 70% 乙醇噴灑所有生長(zhǎng)套件組件小瓶和基礎(chǔ)培養(yǎng)基瓶的外表面，以凈化它們。
使用無(wú)菌技術(shù)并在層流罩或生物安全柜中工作，使用單獨(dú)的無(wú)菌移液器將表 1、2、3、4 或 5 中所示的每個(gè)生長(zhǎng)套件組件的體積轉(zhuǎn)移到基礎(chǔ)培養(yǎng)基瓶中轉(zhuǎn)移。
表 7.添加抗菌劑/抗真菌劑和酚紅（可選）
成分 | 體積 | 最終濃度 |
慶大霉素-兩性霉素B溶液 | 0.5毫升 | 慶大霉素：10 µg/mL 兩性霉素 B：0.25 µg/mL |
青霉素-鏈霉素-兩性霉素B溶液 | 0.5毫升 | 青霉素：10 單位/mL 鏈霉素：10 µg/mL 兩性霉素 B：25 ng/mL |
酚紅 | 0.5毫升 | 33微米 |
蓋緊生長(zhǎng)培養(yǎng)基的瓶子并輕輕旋轉(zhuǎn)內(nèi)容物以確保溶液均勻。請(qǐng)勿用力搖晃，以免產(chǎn)生泡沫。給瓶子貼上標(biāo)簽并注明日期。
完整的生長(zhǎng)培養(yǎng)基應(yīng)在 2°C 至 8°C 的黑暗條件下保存（不要冷凍）。在這些條件下儲(chǔ)存時(shí)，完整培養(yǎng)基可穩(wěn)定保存 30 天。
冷凍保存
1. 檢查所有容器是否有泄漏或破損。
2. 將基礎(chǔ)培養(yǎng)基保存在 2°C 至 8°C 下。不要凍結(jié)。避光。使用前加熱介質(zhì)時(shí)，溫度不要超過(guò) 37°C。當(dāng)在 2°C 至 8°C 的黑暗中儲(chǔ)存時(shí)，產(chǎn)品在標(biāo)簽上的有效期內(nèi)保持穩(wěn)定。
細(xì)菌和真菌測(cè)試:沒(méi)有檢測(cè)到
支原體污染:沒(méi)有檢測(cè)到
內(nèi)毒素:< 0.5 EU/毫升
滲透壓:270±10毫滲透壓/千克
酸堿度:7.8±0.3
功能測(cè)試:增殖率和形態(tài)
本產(chǎn)品僅供實(shí)驗(yàn)室研究使用。它不適用于任何動(dòng)物或人類治療用途、任何人類或動(dòng)物消費(fèi)或任何診斷用途。
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