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美國 Fluorochorome 公司于1985 年成立于美國科羅拉多州丹佛市，Fluorochorome 一直 致力于熒光染料的研究與開發(fā)，其產(chǎn)品Fluoro Gold（熒光金）自 1985 年來在全球范圍 內(nèi)被廣泛應(yīng)用，并有大量的參考文獻(xiàn)。同時，F(xiàn)luorochrome公司特別開發(fā)了高靈敏度的 Fluoro-Gold Antibody 、以及 Fluoro-Ruby（紅色熒光金）等產(chǎn)品，F(xiàn)luorochrome 公司堅 持以優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和熱情的服務(wù)贏得了良好的口碑。

Fluoro-Ruby （熒光紅寶石）是與Fluoro-Gold和Fluoro-Gold 抗體互補的一款順行神經(jīng)示蹤劑。其本質(zhì)是四甲基羅丹明葡聚糖胺（Tetramethylrhodamine dextran-amine），分子量是10,500 Da，Ex=540 nm，Em= 600 nm，發(fā)紅色熒光。

Fluoro-Ruby （熒光紅寶石）是一種快速，靈敏，可靠且技術(shù)操作簡單的熒光順行示蹤劑。同時也是檢測早期急性軸索損傷和衰退的標(biāo)志物。Fluoro-Ruby 的使用原理基本上同與Fluoro-Gold，已經(jīng)流傳使用多年且一致認(rèn)為是好的順行示蹤劑。

工作液配置：用100 µl蒸餾水溶解10 mg Fluoro-Ruby粉末，配置成10%工作液；

﹄ 注射方法：通過腦立體定位注射的方式用1 µl哈密頓微量注射器壓力導(dǎo)入示蹤劑；注射劑量通常為0.02-0.1 µL，以長于10~15 mins的時間間隔逐步加入。

﹄ 作用時間：動物恢復(fù)一段時間后，通常在藥物注射4-~14 天后處死。

﹄ 切片制備：向處死動物體內(nèi)灌注中性甲醛（10%福爾馬林或溶于0.1M 中性磷酸鹽溶液的4%多聚甲醛），腦部摘除后放入添加20%蔗糖（起到冰凍保護(hù)作用）的相同固定液內(nèi)再固定，至少過夜。之后用冰凍滑片式切片機或者恒冷箱切片機對腦組織進(jìn)行切片，厚度通常在20-40 µm。

﹄ 檢測玻片制備：將切片粘附在明膠包被的載玻片上，然后放入玻片加溫器（slide warmer）烘干 （50-60 ℃，至少半小時）；烘干玻片放入二甲苯中浸泡至少一分鐘，用DPX封片劑進(jìn)行封片。

﹄ 熒光觀察：落射熒光顯微鏡檢測，選用適合檢測TRITC的濾片（綠光激發(fā)波段）。

使用指南和協(xié)議

Fluoro-Ruby用戶指南和協(xié)議

10% 的 Fluoro-Ruby 溶液是將 10 mg Fluoro-Ruby 干粉溶解在 100 μL,蒸餾水中制成的。然后通過顱內(nèi)立體定位注射，使用1uL, Hamilton 微量注射器對示蹤劑進(jìn)行壓力注射。注射量通常為 0.02-0.1 L，并在 10-15 分鐘的間隔內(nèi)逐漸注射。讓動物恢復(fù)，通常在 4-14 天后處死。

然后用中性緩沖甲醛(0.1M 中性磷酸鹽緩沖液中的10%福爾馬林或 4%多聚甲醛)對動物進(jìn)行灌注。取出大腦，在相同的固定液中加 20%蔗糖進(jìn)行固定至少一夜，以進(jìn)行冷凍保護(hù)。然后用冷凍滑動切片機或低溫切片機將大腦切成厚度通常在 20 至 40 微米之間的切片。

將組織切片安裝在明膠涂層載玻片上，并在 50-60 攝氏度的載玻片加熱器上風(fēng)干至少半小時。然后將干燥的載玻片轉(zhuǎn)移到二甲苯透明溶液中至少一分鐘，然后用 DPX封固劑蓋玻片。然后可以在熒光顯微鏡下使用適合可視化 TRITC(綠光激發(fā))的濾光片檢查載玻片。

氟紅寶石產(chǎn)品信息

*注意:熒光金、熒光金抗體和熒光紅寶石僅供實驗室研究動物或體外試驗研克使用。不可用于人體。這些藥物供定期從事神經(jīng)解

胡等研充和體外試驗或僅用于安驗室研克的動物的人員使用。

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