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即使在具挑戰(zhàn)性的組織中也能顯示出真正的免疫熒光在組織切片中，自發(fā)熒光是不需要的熒光，它使得很難或不可能區(qū)分抗原特異性信號和非特異性背景噪聲。Vector®TrueVIEW®自發(fā)熒光猝滅試劑盒(SP-8400-15)提供了一種新的方法來減少非脂褐質(zhì)來源的不需要的自體熒光并顯著提高信噪比。如果您需要具有以下特性的自發(fā)熒光封閉劑，請使用TrueVIEW：專門減少非脂褐素來源的自發(fā)熒光易于使用與多種熒光團兼容與標(biāo)準(zhǔn)落射熒光和共焦激光顯微鏡兼容

檢測試劑和目標(biāo)蛋白質(zhì)元件之間的非特異性蛋白質(zhì)相互作用可能會導(dǎo)致不需要的背景染色。為了最大限度地減少這種類型的相互作用，請使用適當(dāng)?shù)牡鞍踪|(zhì)封閉試劑：正常血清—廣泛用作組織和細(xì)胞染色中的通用蛋白塊。為了獲得最佳結(jié)果，請選擇與二抗種類相匹配的用于封閉的血清種類。無碳封閉液(SP-5040)–用于凝集素染色或用于多重IHC應(yīng)用。凝集素用于至少一種標(biāo)記，因為該溶液不含干擾糖蛋白。BSA(SP-5050)—我們的BSA不含其他等級BSA中存在的糖蛋白和雜質(zhì)，并且可能會引入偽影或增加背景染...

一、鄰位連接適用的最短和最長距離是多少？所有的Duolink®PLA產(chǎn)品都是被設(shè)計用于鄰位檢測的。當(dāng)使用二抗方法時，理論上在兩種靶標(biāo)蛋白（表位）間產(chǎn)生信號的最長距離為40nm。這些數(shù)據(jù)是基于抗體的平均直徑約為10nm而計算出來的。Duolink®PLA理論上可檢測距離在0nm之內(nèi)的兩個表位，只要兩種單抗可發(fā)生結(jié)合并且不存在位阻。二、Duolink®PLA產(chǎn)品或試劑可持續(xù)多久？1.檢測試劑盒中的所有試劑必須總是被保存在-20°C。這一點對于連接酶和聚合酶...

建議及技巧：用于蛋白檢測的Duolink®PLA技術(shù)可提供一種具有一系列明確定義步驟的簡易而直接的實驗方法。該章節(jié)將會對可確保Duolink®PLA實驗順利進行的一些重要注意事項進行描述。一、前期考慮：1.采用在待測樣品內(nèi)可具有最佳一抗性能的條件。這些條件包括樣品處理參數(shù)（固定、通透化、抗原修復(fù)等）、一抗效價以及孵育時間。2.為了可對結(jié)果進行正確的評估，在實驗中總是需要設(shè)置技術(shù)及可用的生物學(xué)對照。3.Duolink®PLAControlKit是一款可對...

Duolink®PLA結(jié)果為蛋白質(zhì)事件（表達(dá)、相互作用或修飾）提供了相對定量。因此，加入技術(shù)對照組，以及在可能的情況下加入生物對照組，是十分重要的。技術(shù)對照：每個Duolink®PLA實驗中應(yīng)該包含兩個技術(shù)對照組。這包括：1.分別省略一種一抗用于檢測每種一抗的非特異性結(jié)合有助于確定最佳一抗效價2.省略所有一抗用于檢測系統(tǒng)中Duolink®PLA探針的非特異性結(jié)合生物對照：除了技術(shù)對照外，強烈建議使用生物對照。陽性和陰性生物對照均可提供有價值的信息。1....

一、樣品選擇對樣品和蛋白質(zhì)靶標(biāo)的已有了解十分重要。選擇具有已知靶蛋白表達(dá)的系統(tǒng)將顯著增加Duolink®PLA實驗成功的幾率。Duolink®PLA實驗所需的樣本與用于傳統(tǒng)免疫熒光(IF)、免疫組織化學(xué)(IHC)或流式細(xì)胞術(shù)的樣本相同。因此，Duolink®PLA試劑適用多種樣品類型，包括：1.貼壁細(xì)胞2.懸浮細(xì)胞3.血細(xì)胞4.細(xì)胞離心涂片制劑5.石蠟包埋細(xì)胞樣品6.石蠟包埋組織切片7.冰凍組織切片8.新鮮組織切片在進行Duolink®PLA實...